免疫層析法作為定性體外診斷試劑的主流技術之一（如膠體金法），通過抗原-抗體特異性結合實現(xiàn)快速檢測。精密度研究是評價試劑結果一致性的核心環(huán)節(jié)，直接關系到臨床使用的可靠性。根據(jù)國家藥監(jiān)局審評中心的指導，這類試劑的精密度研究需系統(tǒng)性設計實驗，覆蓋可能影響結果的關鍵變量，并采用科學的數(shù)據(jù)分析方法。下面具體展開研究中的關鍵步驟。

樣本濃度的選擇與設計

精密度研究必須包含不同濃度的樣本，尤其是接近臨界值的濃度水平。例如：

- 陰性樣本（不含目標物）

- 弱陽性樣本（略高于檢出限）

- 中/強陽性樣本（典型病理濃度）

這種設計能驗證試劑在不同濃度下的穩(wěn)定性。實際操作中，建議使用臨床真實樣本或經(jīng)標定的質(zhì)控品，避免人工模擬樣本帶來的偏差。若樣本穩(wěn)定性不足，需分裝凍存并驗證凍融影響。

試劑批次與檢測輪次的安排

至少納入3個不同生產(chǎn)批次的試劑，每批次進行多輪重復檢測（通常≥20次）。重點觀察：

- 同一批次內(nèi)結果的重復性

- 不同批次間結果的一致性

批次差異可能來自原料、包被工藝或生產(chǎn)環(huán)境變化，多輪次測試可暴露潛在波動。

時間與操作者因素的納入

實驗需跨越不同日期（建議≥5天），由多名操作者（≥2人）參與檢測。例如：

- 操作者A在周一、周三檢測

- 操作者B在周二、周四檢測

此舉可評估人員操作差異、環(huán)境溫濕度變化、設備校準狀態(tài)等日常變量對結果的影響。

地點差異的驗證要求

若試劑擬在多機構使用，需在≥2個實驗室進行比對研究。各實驗室應：

- 采用統(tǒng)一實驗方案

- 使用相同型號設備

- 獨立報告數(shù)據(jù)

通過分析實驗室間差異（如顯色強度偏差），確認試劑的跨場地適用性。

數(shù)據(jù)記錄與分析方法

除常規(guī)陰陽性結果外，必須記錄與標準色卡的比對標值（如L1、L2、L3等級）：

1. 顯色強度量化：將檢測線顏色與色卡對照，記錄具體等級而非主觀描述；

2. 一致性分析：計算不同條件下L值的變異系數(shù)（CV%），超過15%需排查原因；

3. 臨界樣本重點分析：對弱陽性樣本，統(tǒng)計假陰性/假陽性率，確保臨床決策安全。

總結

對于以膠體金法等免疫層析法為檢驗原理的定性體外診斷試劑，在進行精密度研究時，應考慮不同樣本濃度、試劑批次、檢測輪次、時間、操作者、地點等影響因素進行實驗設計。在檢測結果中，不僅需要提交陰陽性結果，還應提交與標準色卡比對的數(shù)據(jù)（例如L1、L2、L3……），并對顯色強度進行一致性分析。